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<title>Proximity Ligation Assay</title>
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<h1 id="firstHeading" class="firstHeading mw-first-heading"><span class="mw-page-title-main">Proximity Ligation Assay</span></h1>
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<div id="mw-content-text" class="mw-body-content mw-content-ltr" lang="de" dir="ltr"><div class="mw-content-ltr mw-parser-output" lang="de" dir="ltr"><p>Der <b>Proximity Ligation Assay </b> (<i>in situ PLA</i>) ist eine biochemische Methode zum Nachweis von <a href="Protein-Protein-Interaktion" title="Protein-Protein-Interaktion">Protein-Protein-Interaktionen</a>.<sup id="cite_ref-1" class="reference"><a href="#cite_note-1"><span class="cite-bracket">[</span>1<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> Der PLA ist eine Kombination aus einem <a href="ELISA" class="mw-redirect" title="ELISA">ELISA</a> mit einer Signalverstärkung durch eine <a href="Polymerasekettenreaktion" class="mw-redirect" title="Polymerasekettenreaktion">Polymerasekettenreaktion</a> und daher verwandt mit einer <a href="Immuno-Polymerasekettenreaktion" class="mw-redirect" title="Immuno-Polymerasekettenreaktion">Immuno-Polymerasekettenreaktion</a>.
</p>
<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Prinzip">Prinzip</h2></div>
<p>Gegen beide vermuteten Interaktionspartner werden <a href="Antik%C3%B6rper" title="Antikörper">Antikörper</a> unterschiedlicher Spezies benötigt. Nach einer Bindung zweier Interaktionspartner aneinander erfolgt die Detektion anhand von unterschiedlichen <a href="Immunkonjugat" title="Immunkonjugat">Immunkonjugaten</a>. Die Immunkonjugate tragen unterschiedliche <a href="Oligonukleotid" class="mw-redirect" title="Oligonukleotid">Oligonukleotide</a>, die nach Zugabe zweier Adapter-Oligonukleotide aufgrund der räumlichen Nähe gemeinsam einen Ring bilden, der nach einer <a href="Ligation" title="Ligation">Ligation</a> mithilfe einer DNA-Polymerase durch <a href="Rolling_circle_replication" class="mw-redirect" title="Rolling circle replication">Rolling circle replication</a> vervielfältigt wird. Somit können Interaktionen von wenigen Molekülen nachgewiesen werden, jedoch müssen spezifische Antikörper für beide Interaktionspartner vorhanden sein. Dies setzt die Kenntnis beider Partner voraus, wodurch die Methode zur Bestätigung der Ergebnisse anderer Methoden zur Bestimmung von Protein-Protein-Interaktionen verwendet wird. Mit einer <a href="Fluoreszenz" title="Fluoreszenz">Fluoreszenz</a>-markierten <a href="Hybridisierungssonde" class="mw-redirect" title="Hybridisierungssonde">Hybridisierungssonde</a> kann mit einem <a href="Fluoreszenzmikroskop" class="mw-redirect" title="Fluoreszenzmikroskop">Fluoreszenzmikroskop</a> die Interaktion in <a href="Zelle_(Biologie)" title="Zelle (Biologie)">Zellen</a> und Gewebeschnitten aufgrund der fluoreszenten Färbung im Vergleich zu den <a href="Negativkontrolle" class="mw-redirect" title="Negativkontrolle">Negativkontrollen</a> nachgewiesen werden.<sup id="cite_ref-2" class="reference"><a href="#cite_note-2"><span class="cite-bracket">[</span>2<span class="cite-bracket">]</span></a></sup>
</p>
<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Einzelnachweise">Einzelnachweise</h2></div>
<ol class="references">
<li id="cite_note-1"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-1">↑</a></span> <span class="reference-text">O. Söderberg, M. Gullberg, M. Jarvius, K. Ridderstråle, K. J. Leuchowius, J. Jarvius, K. Wester, P. Hydbring, F. Bahram, L. G. Larsson, U. Landegren: <i>Direct observation of individual endogenous protein complexes in situ by proximity ligation.</i> In: <i>Nature methods.</i> Band 3, Nummer 12, Dezember 2006, <span class="-print"><a href="Internationale_Standardnummer_f%C3%BCr_fortlaufende_Sammelwerke" title="Internationale Standardnummer für fortlaufende Sammelwerke">ISSN</a> <span style="white-space:nowrap"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://zdb-katalog.de/list.xhtml?t=iss%3D%221548-7091%22&key=cql">1548-7091</a></span></span>, S. 995–1000, <a href="Digital_Object_Identifier" title="Digital Object Identifier">doi</a>:<span class="uri-handle" style="white-space:nowrap"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1038/nmeth947">10.1038/nmeth947</a></span>. <a class="external mw-magiclink-pmid" rel="nofollow" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17072308?dopt=Abstract">PMID 17072308</a>.</span>
</li>
<li id="cite_note-2"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-2">↑</a></span> <span class="reference-text">M. Jarvius, J. Paulsson, I. Weibrecht, K. J. Leuchowius, A. C. Andersson, C. Wählby, M. Gullberg, J. Botling, T. Sjöblom, B. Markova, A. Ostman, U. Landegren, O. Söderberg: <i>In situ detection of phosphorylated platelet-derived growth factor receptor beta using a generalized proximity ligation method.</i> In: <i>Molecular & cellular proteomics : MCP.</i> Band 6, Nummer 9, September 2007, <span class="-print"><a href="Internationale_Standardnummer_f%C3%BCr_fortlaufende_Sammelwerke" title="Internationale Standardnummer für fortlaufende Sammelwerke">ISSN</a> <span style="white-space:nowrap"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://zdb-katalog.de/list.xhtml?t=iss%3D%221535-9476%22&key=cql">1535-9476</a></span></span>, S. 1500–1509, <a href="Digital_Object_Identifier" title="Digital Object Identifier">doi</a>:<span class="uri-handle" style="white-space:nowrap"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1074/mcp.M700166-MCP200">10.1074/mcp.M700166-MCP200</a></span>. <a class="external mw-magiclink-pmid" rel="nofollow" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17565975?dopt=Abstract">PMID 17565975</a>.</span>
</li>
</ol></div><!--htdig_noindex--><div><div class="zim-footer">
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